為啥細胞養著養著突然死了，可能是培養箱里忘了加這個！

一、核心作用：水盤不是 “擺設”，是細胞的 “濕度屏障”

CO?培養箱對細胞生長的核心保障之一，是維持約 90% 的相對濕度環境。而水盤的核心功能，就是通過自身蒸發面提供穩定加濕，這是最直接且基礎的被動加濕方案。

細胞賴以生存的培養基，其成分穩定性直接決定細胞狀態。一旦箱內濕度不足，培養基會快速蒸發，導致其中的離子濃度、營養成分比例失衡，滲透壓發生劇烈變化。這種環境突變會讓細胞陷入應激狀態，最終因無法適應而死亡?？梢哉f，水盤的存在，本質是為細胞構建了一道 “濕度屏障”，避免外部環境波動對培養基造成破壞，進而保障實驗的基礎條件穩定。

二、正確操作：四大關鍵要點，缺一不可

水盤的使用看似簡單，但每一個細節都影響著細胞培養結果。規范操作需牢牢把握以下四點：

1. 水源選擇：無菌蒸餾水是最優解

水源的選擇直接關系到水盤壽命與細胞安全。絕對不能直接使用自來水，其含有的雜質和微生物會成為直接污染源；也不建議使用超純去離子水，這類水導電性極低，極易吸收箱內 CO?形成微酸性環境，加速培養箱內部金屬部件腐蝕，同時可能間接影響細胞生長。

多數廠家的維護手冊明確推薦，應使用符合特定電阻率標準的無菌蒸餾水，既能避免微生物污染，又能減少對設備和細胞的不良影響。

2. 加水頻率：每周更換是底線

不少實驗室存在 “缺水才補” 的習慣，這是絕對不可取的。水盤內的水長期存放，會成為微生物滋生的溫床，生物膜、藻類或真菌的形成，會讓水盤變成周期性污染源，反復影響細胞培養。

對常規實驗室而言，每周徹底更換一次水是基本要求；若實驗室開門頻繁、環境粉塵較多，或培養箱使用頻率極高，需縮短檢查與更換周期，確保水質始終處于無菌狀態。

3. 清潔流程：75% 乙醇擦拭是關鍵

每次換水時，必須將水盤取出進行徹底清潔。清潔時應使用 75% 乙醇擦拭托盤內外，或遵循廠家推薦的滅菌方法，重點清除殘留的生物膜和沉淀物 —— 這些污染物肉眼可能不可見，但卻是污染的重要源頭。

清潔后需用無塵紙將水盤擦干，再重新加入新的無菌蒸餾水，避免殘留水分攜帶雜質進入培養箱。

4. 濕度控制：避免 “過度加濕”

加水時需嚴格按照水盤上的 “max” 標線操作，切勿加滿溢出。過高的濕度或箱內外溫差，會導致培養箱內壁形成凝露。這些凝結的水滴一旦滴落至培養皿或培養瓶中，不僅會引入污染風險，還會稀釋局部培養基的溶質濃度，破壞細胞生長環境。

三、常見誤區：這三個 “想當然”，正在毀掉你的實驗

關于水盤的使用，實驗室中存在不少根深蒂固的錯誤認知，每一個都可能成為實驗失敗的隱患。

誤區一：水越純越好

超純水并非細胞培養的 “最優水源”。如前所述，超純水的低電導率使其對 CO?的吸收能力極強，易形成微酸性環境，不僅會腐蝕設備，還可能通過濕度環境間接影響細胞的酸堿平衡，尤其對敏感細胞系的影響更為明顯。遵循廠家推薦的水質標準，才是最穩妥的選擇。

誤區二：只補水不換水

“只要沒干就不用換” 的想法，是污染防控的大忌。即使定期補水，水盤內的微生物也會持續繁殖，形成難以清除的生物膜。這些微生物會隨著蒸發的水汽擴散到培養箱內，成為交叉污染的源頭，導致實驗重復性下降，甚至出現批量細胞污染死亡。定期更換與清潔，是杜絕此類問題的唯一途徑。

誤區三：加抗菌劑就萬無一失

部分科研人員為了 “省事”，會在水盤中添加抗菌劑抑制微生物生長。但這種做法存在多重風險：抗菌劑的揮發性可能直接影響細胞代謝，部分成分還可能與培養箱的材質發生反應，損壞設備。在添加任何化學物質前，必須全面評估其對細胞、設備的潛在影響，若無明確的廠家指導，切勿盲目使用。

四、污染防控：水盤是 “濕度源”，也是 “污染源”

水盤在提供濕度的同時，也為微生物生長提供了理想環境。其污染途徑主要有四類：水源本身攜帶微生物；水盤內壁形成生物膜；開關培養箱時，空氣中的孢子與污染物進入水盤；清潔不徹底導致殘留污染。

針對這些風險，防控措施需精準落地：堅持使用無菌蒸餾水，從源頭減少污染；嚴格執行每周更換與清潔流程，破壞微生物生長周期；對于高要求的細胞培養場景，可選擇配備 HEPA 過濾系統或自動除濕、凝露控制功能的高級培養箱，進一步降低污染概率。

五、無盤培養箱：優勢與局限并存

近年來，部分廠家推出了無盤設計的 CO?培養箱，通過內置加濕系統（如大容量受控水箱、加熱蒸發板等）實現濕度控制。這類設計的核心優勢在于減少清潔難度，從根本上消除水盤帶來的污染風險，同時縮短濕度恢復時間，尤其適合對無菌性要求極高的實驗場景。

但無盤培養箱也存在明顯局限：其制造成本更高，設備采購價格遠高于傳統培養箱。對于預算有限的實驗室而言，與其盲目追求高端設備，不如將水盤的規范管理納入日常維護流程，同樣能實現穩定的培養效果。

六、實操 SOP：水盤管理的 “標準化流程”

將水盤管理納入培養箱日常維護 SOP，是保障實驗重復性與細胞健康的關鍵。以下流程可直接落地執行：

1. 每周維護

取出水盤，徹底倒掉舊水；用 75% 乙醇全面擦拭托盤內外，再用無菌蒸餾水沖洗干凈；用無塵紙擦干后，重新加入足量無菌蒸餾水；在實驗室記錄本上清晰標注更換日期，形成可追溯的維護記錄。

2. 日常檢查

每日實驗前或每次開關培養箱后，檢查水盤水位，確保處于 “max” 標線附近，不足時及時補充；同時觀察培養箱內部是否有凝露、異常氣味或霉斑，發現問題及時處理。

3. 問題排查

當細胞出現不明原因死亡、生長狀態異常，或實驗重復性突然下降時，應優先將水盤列為污染源排查對象。核對維護記錄，檢查水盤內水質是否渾濁、有無生物膜形成，必要時立即更換新水并徹底清潔，避免污染擴散。