蘇云金芽孢桿菌
1. 分類學(xué)地位
域:細(xì)菌域 Bacteria
門:厚壁菌門 Firmicutes
綱:芽孢桿菌綱 Bacilli
目:芽孢桿菌目 Bacillales
科:芽孢桿菌科 Bacillaceae
屬:芽孢桿菌屬 Bacillus
種:蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
2. 培養(yǎng)狀態(tài)
培養(yǎng)基:普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂或LB培養(yǎng)基,需氧條件下生長(zhǎng)。
菌落特征
灰白色、邊緣不規(guī)則的菌落,表面粗糙,常伴隨芽孢形成。
在含葡萄糖的培養(yǎng)基中可能產(chǎn)生酸。
特殊結(jié)構(gòu)
芽孢:橢圓形,位于菌體中央或近端,耐高溫。
伴孢晶體(Cry蛋白晶體):芽孢形成時(shí)產(chǎn)生,具有殺蟲(chóng)活性(主要特征)。
生長(zhǎng)條件:最適溫度28–30℃,pH 6.0–7.5,需氧或兼性厭氧。
致病性、實(shí)驗(yàn)室診斷與臨床意義
1.致病性與作用機(jī)制
靶標(biāo)生物
特異性殺蟲(chóng),主要針對(duì)昆蟲(chóng)幼蟲(chóng):鱗翅目(如棉鈴蟲(chóng)、玉米螟)、雙翅目(如蚊、蠅)、鞘翅目(如甲蟲(chóng))。
對(duì)人類及哺乳動(dòng)物:無(wú)毒(Cry蛋白需特定昆蟲(chóng)腸道環(huán)境激活)。
作用機(jī)制
伴孢晶體:含Cry毒素(δ-內(nèi)毒素),被昆蟲(chóng)攝食后,在堿性腸道中溶解。
毒素激活:腸道蛋白酶切割Cry蛋白,生成活性毒素片段。
細(xì)胞穿孔:毒素結(jié)合中腸上皮細(xì)胞受體,形成孔道,導(dǎo)致細(xì)胞裂解、昆蟲(chóng)死亡。
2.實(shí)驗(yàn)室診斷
形態(tài)學(xué)觀察
革蘭氏染色陽(yáng)性,桿狀,成鏈或單列。
顯微鏡下可見(jiàn)芽孢和菱形/雙錐形伴孢晶體(需芽孢染色或相差顯微鏡)。
生化鑒定
過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性,VP試驗(yàn)陽(yáng)性,可水解淀粉。
分子檢測(cè)
PCR檢測(cè):靶向cry基因(如cry1Ab、cry4B)或16S rRNA序列。
蛋白分析:SDS-PAGE檢測(cè)Cry蛋白(約65–140 kDa)。
生物測(cè)定
對(duì)靶標(biāo)昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)進(jìn)行毒力測(cè)試(LC??測(cè)定)。
3.應(yīng)用與臨床意義
農(nóng)業(yè)與林業(yè)
生物農(nóng)藥:Bt制劑(粉劑、懸浮液)廣泛用于有機(jī)農(nóng)業(yè),替代化學(xué)殺蟲(chóng)劑。
轉(zhuǎn)基因作物:cry基因轉(zhuǎn)入作物(如Bt棉花、Bt玉米),賦予抗蟲(chóng)性。
公共衛(wèi)生
蚊蟲(chóng)控制:用于滅蚊幼蟲(chóng)(登革熱、瘧疾防控)。
環(huán)境安全:對(duì)非靶標(biāo)生物(哺乳動(dòng)物、鳥(niǎo)類、益蟲(chóng))安全,易降解,無(wú)殘留污染。
耐藥性與挑戰(zhàn)
耐藥性
長(zhǎng)期單一使用可能導(dǎo)致昆蟲(chóng)產(chǎn)生抗性(如小菜蛾對(duì)Cry1Ac的抗性)。
應(yīng)對(duì)策略
輪換使用不同作用機(jī)制的Bt亞種或毒素類型。
結(jié)合其他生物防治手段(如昆蟲(chóng)病原線蟲(chóng))。
小結(jié)
蘇云金芽孢桿菌是生物防治領(lǐng)域的“明星菌”,其特異性殺蟲(chóng)機(jī)制和安全性使其成為可持續(xù)農(nóng)業(yè)的核心工具。


