嚴(yán)格厭氧菌推薦培養(yǎng)容器
預(yù)還原培養(yǎng)基的適宜容器是成功培養(yǎng)嚴(yán)格厭氧菌的重要前提。為此,開發(fā)了特殊的玻璃器皿,可方便地實(shí)現(xiàn)完全的氣密密封。其中,橡膠塞材質(zhì)至關(guān)重要。只有丁基橡膠(butyl rubber)制成的塞子或隔墊才能有效阻止空氣滲透進(jìn)入容器。然而,注射針頭反復(fù)穿刺塞子可能導(dǎo)致其透氧性增加。通常,塞子越厚,可重復(fù)使用的次數(shù)越多,同時(shí)保持其不透氣性。
市售適用于厭氧培養(yǎng)的容器主要有兩種類型:
? Hungate管:通過帶有凸緣式丁基橡膠隔墊(flange-type butyl rubber septum)和開孔直徑9mm的螺帽密封。該設(shè)計(jì)允許使用注射針頭穿刺隔墊進(jìn)行操作。
? Balch管:比Hungate管更堅(jiān)固。若培養(yǎng)過程中可能產(chǎn)生2至3 bar(巴)的超壓,推薦使用此類型。其采用厚丁基橡膠塞密封,并通過鋁蓋卷邊(aluminium crimp)固定。密封和移除鋁蓋需使用專用工具(卷邊器/開蓋器)。
作為Balch管的替代品,也可使用各種規(guī)格的血清瓶(serum bottles)。然而,血清瓶的堅(jiān)固性不及Balch管。若培養(yǎng)的菌株預(yù)計(jì)在培養(yǎng)過程中會(huì)產(chǎn)生大量氣體(見下文),操作時(shí)須格外謹(jǐn)慎。
預(yù)還原培養(yǎng)基可在上述兩種容器中,于室溫避光條件下保存數(shù)周而不被氧化。
警告: 部分微生物在生長過程中會(huì)產(chǎn)生大量氣體(例如梭菌通過發(fā)酵產(chǎn)氣)。在密閉容器中生長時(shí),產(chǎn)生的氣體可導(dǎo)致顯著超壓。已知生長過程中會(huì)積累氣體的菌株,應(yīng)接種于液體培養(yǎng)基填充量不超過容器容積25% 的容器中進(jìn)行培養(yǎng)。此外,對于生長快速的菌株,其培養(yǎng)物應(yīng)至少每日排氣一次以避免超壓。操作可能存在超壓的玻璃容器時(shí),必須佩戴防護(hù)目鏡!


