微生物培養的基本過程
微生物培養在微生物實驗室中是一項關鍵的技術,微生物培養結果的好壞對微生物研究工作至關重要。微生物培養的基本過程如下:
1.準備培養基
培養基含有微生物所需的營養物質,包括碳源、氮源、能源、無機鹽、生長因子和水。合適的培養基能夠為微生物的生長提供一個適宜的生存環境,以獲得生長良好的菌株。因此,在準備培養基前,應當考慮目的菌株的生長需求,選擇合適的培養基。
選擇培養基一般有四個基本原則:
目的明確:明確擬培養何種微生物;明確培養的微生物是用于實驗室研究還是用于生產;明確微生物的生長特性等等目的;
營養協調:根據微生物的生長特性確定合適的碳氮比,一般來說,細菌的碳氮比低,真菌的碳氮比高。
理化適宜:培養基的pH、滲透壓和水活度等理化環境應當適宜,即在配制培養基過程中,需要調節培養基的pH、滲透壓和水活度等,如:在最適pH方面,細菌是6.5-7.5,霉菌是4.0-5.8,放線菌是7.5-8.5,酵母菌是3.8-6.0,藻類是6.0-7.0,原生動物為6.0-8.0,部分嗜極菌的對pH要求更高。
成本問題:此部分主要涉及生產過程,顯而易見,選擇合適且成本低的培養基能夠收獲更多的經濟效益。
培養基根據不同物理形態可以分為液體培養基、固體培養基、半固體培養基和脫水培養基,也可以根據功能不同分為選擇性培養基和鑒定性培養基。
因此,準備培養基需要綜合考慮微生物的生長特性及培養目的選擇合適的培養基。
2.物料滅菌
培養基準備完成后,需要按照其特性進行滅菌處理,同時準備其他實驗物料,進行滅菌工作。此步驟是防止在后續培養微生物過程中引入其它微生物,造成雜菌污染的情況。
3.接菌
此步驟需要掌握無菌操作的技術,將目的菌株進行接種的過程,如菌種的復蘇,以平板劃線法將保藏的菌株在無菌操作下完成接種的過程。
4.微生物培養
完成微生物接種后,將目的菌株放置于合適培養環境中進行培養,其環境包括:是否需氧、溫度、濕度、二氧化碳含量等條件的設置,如溫度:細菌一般設置為30-40℃,放線菌30℃,酵母菌25-37℃,霉菌30℃。
5.觀察與記錄
微生物培養后,需要對微生物的生長情況進行觀察和記錄,包括菌落的形態、大小、顏色以及數目等,其生長情況關乎著后續的實驗。
6.收獲與保藏
在培養基中生長到一定程度的微生物可用來后續的實驗研究、生產和保藏,根據不同的目的對其進行處理。
7.微生物檢測
培養得到的微生物,可以對其進行檢測,包括:微生物鑒定、藥敏試驗測試和代謝產物檢測等等,此步驟是驗證培養的微生物是否符合目的要求。
8.微生物滅菌
當微生物完成相應檢測、生產和實驗研究后,需要對微生物進行滅菌處理,此步驟是為了防止微生物的污染。
綜上所述,可以知道,微生物培養的基本操作如下:
配制培養基:選擇合適的培養基后,計算和稱量所需用量,將培養基溶解,分裝至合適的容器,然后包裝;
物料滅菌:將配制好的培養基與實驗所需的物料進行滅菌處理;
接菌:無菌操作完成接菌過程;
培養:在適宜培養條件下進行微生物的培養過程;
檢測與保藏:對培養得到的微生物作相關檢測或將微生物保藏;
廢棄微生物的處理:對完成研究或生長的微生物進行滅菌處理。
以上是微生物培養的基本過程和操作,更加具體的培養過程需要依據不同的微生物進行調整。


