人類嗜T細(xì)胞病毒特異性抗體的檢測(cè)方法
簡(jiǎn)介
檢測(cè)特異性抗體是 HTLV 感染實(shí)驗(yàn)室診斷的主要依據(jù)。檢測(cè)程序?yàn)橄冗M(jìn)行初篩試驗(yàn),初篩試驗(yàn)陽性血清需經(jīng) WB 試驗(yàn)確認(rèn)。目前初篩試驗(yàn)常用方法是 ELISA 法和間接免疫熒光法。
材料與儀器
試劑:
① 抗人 IgG;
② HTLV-1/2 抗體。
步驟
人類嗜 T 細(xì)胞病毒特異性抗體的檢測(cè)方法的基本過程可分為如下幾步:
(一)ELISA 法
A 用 HTLV-1 型病毒裂解物或裂解物+重組 p21 蛋白作為抗原,與患者血清反應(yīng)后再加酶標(biāo)記的抗人 IgG,最后加酶底物顯色來檢測(cè)血清中的 HTLV-1/2 抗體;HTLV-1 型和 HTLV-2 型有血清交叉反應(yīng),常規(guī)血清學(xué)方法不能區(qū)分,可使用重組 Env 蛋白或型特異性合成肽抗原檢測(cè)相應(yīng)抗體,區(qū)別 HTLV-1 型和 HTLV-2 型感染。ELISA 檢查 HTLV 抗體快速、敏感,但缺乏特異性,可出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。經(jīng) ELISA 初篩后陽性血清需用 WB 試驗(yàn)確認(rèn)。
(二)間接免疫熒光法
B 以 HTLV-1/2 感染的 T 細(xì)胞株作靶細(xì)胞抗原制成細(xì)胞涂片,加入患者血清反應(yīng)后再加熒光素標(biāo)記的抗人 IgG,熒光顯微鏡下觀察熒光陽性細(xì)胞,判定患者血清中有無特異性 HTLV-1/2 抗體。陽性血清需經(jīng) WB 試驗(yàn)確認(rèn)。


