細菌的生化反應
一、糖類代謝
(1)糖類發酵試驗:鑒定細菌最主要、最基本試驗(尤其對腸桿菌屬);
(2)氧化-發酵試驗(O/F 試驗):氧化型(需分子氧參與)、發酵型(進行無氧降解,發酵型細菌在無氧狀態下也能分解葡萄糖)、產堿型(不分解葡萄糖的細菌);用于區別細菌的代謝類型;
(3)β-半乳糖苷酶試驗(ONPG 試驗):有些細菌只有半乳糖苷酶,因而只能遲緩發酵乳糖,所有乳糖快速發酵和遲緩發酵的細菌均可快速水解鄰一硝基酸-β-D-半乳糖苷而生成黃色的鄰-硝基酚,主要用于枸橡酸菌屬、亞利桑那菌屬與沙門菌屬的鑒別;
(4)七葉苷水解試驗:七葉苷與二價鐵反應使培養基變黑;主要用于鑒別D群鏈球菌與其他鏈球菌,以及腸桿菌科的某些種及某些厭氧菌(如脆弱擬桿菌等)的初步鑒別;
(5)甲基紅試驗:某些細菌在糖代謝過程中,分解葡萄糖產生丙酮酸,丙酮酸進一步被分解為甲酸、乙酸和琥珀酸等,使培養基pH值下降至4.5以下時,加入甲基紅試劑呈紅色,常用于腸桿菌科內某些種屬的鑒別,如大腸埃希氏菌和產氣腸桿菌,前者為陽性,后者為陰性;
(6)V-P試驗:紅色者為陽性,黃色或類似銅色為陰性,主要用于大腸埃希氏菌和產氣腸桿菌的鑒別。
二、蛋白質與氨基酸代謝
(1)明膠液化試驗:培養基液化為陽性;常用于腸桿菌科的鑒別;
(2)吲哚(靛基質)試驗:分解色氨酸生成紅色吲哚為陽性;常用于腸桿菌科細菌的鑒定,如大腸埃希菌、變形桿菌陽性,志賀菌、沙門菌陰性;
(3)硫化氫試驗:分解含硫氨基酸產生黑褐色沉淀為陽性;用于腸桿菌科中屬及種的鑒別(沙門菌、愛德華菌屬、亞利桑那菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬細菌為陽性,少數沙門菌屬為陰性);
(4)尿素分解試驗:產生大量氨使酚紅變紅;常用于腸桿菌中變形桿菌屬鑒定;
(5)苯丙氨酸脫氨酶試驗:變形桿菌屬、普羅威登斯菌屬、摩根菌屬細菌為陽性;
(6)氨基酸脫羧酶試驗:生成胺和二氧化碳,使溴甲酚紫變紫色;主要用于腸桿菌科鑒別
三、碳源和氮源利用試驗
(1)枸橡酸鹽利用試驗:用于腸桿菌科中菌屬間的鑒定(沙門菌、克雷伯菌屬常為陽性)(2)丙二酸鹽利用試驗:用于腸桿菌科屬及種的鑒別(克雷伯菌屬為陽性)
四、各種酶類試驗
(1)氧化酶試驗:主要用于腸桿菌科與假單胞菌鑒別;
(2)過氧化氫酶試驗(觸酶試驗):G+球菌初步分群(葡萄球菌和微球菌陽性,鏈球菌陰性);
(3)硝酸鹽還原試驗:出現紅色為陽性(腸桿菌科細菌均能還原亞硝酸鹽為陽性);
(4)脂酶試驗:藍色為陽性,用于厭氧菌鑒別;
(5)卵磷脂酶試驗:出現乳白色混濁環為陽性;主要用于厭氧菌鑒別(產氣莢膜梭菌、諾維梭菌陽性,其余梭菌陰性)
(6)DNA酶試驗:出現透明環為陽性;腸桿菌中沙雷菌與變形桿菌陽性,其余陰性;G+球菌中只有金黃色葡萄球菌陽性,其余陰性;
(7)凝固酶試驗:鑒定葡萄球菌致病性重要指標(金黃色葡萄球菌為陽性)。


