Biotin-HCPT生物素化羥喜樹堿的合成以及檢測說明
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Biotin-HCPT生物素化羥喜樹堿的合成以及檢測說明
羥基喜樹堿(10-HCPT;10-Hydroxycamptothecin) 是一種從喜樹中分離的 DNA 拓撲異構酶 I (DNA topoisomerase I) 抑制劑。(S)-10-Hydroxycamptothecin 可顯著誘導細胞凋亡，并可用于肝癌，胃癌，結腸癌和白血病的研究。
Biotin-HCPT生物素化羥喜樹堿的合成示意圖
Biotin-HCPT生物素化羥喜樹堿的純化KTA 中低壓液相系統中采用 Resource15 反相柱以如下條件進行純化分液：體積分數為 30%的甲醇、體積分數為 70%的乙腈。洗脫梯度：A 液洗(100%(20CV)、100%B 液(5CV)，檢測波長：358 nm。洗脫流速為 1.0 mL圖的出峰情況，相應收集各個色譜峰，將其濃縮蒸干，冷凍干燥后用方法斷哪個產物是生物素化羥喜樹堿。素化羥喜樹堿的液質聯用檢測樹堿生物素化合成反應液純化分離產物用 HPLC-MS 分析儀和分析型 柱進行對產物的純度、分子量和化學結構進行分析鑒定。
生物素化羥喜樹堿的純化分離色譜圖
制不同加藥濃度下的細胞生長抑制曲線，計算藥物對細胞的半數抑制50%時藥物的濃度)。驗結果生物素化羥喜樹堿的制備與鑒定用酯化法合成 Biotin-HCPT，由于 HCPT 含有 2 個可參加反應的羥基 的生物活性，加入了過量的 HCPT 以得到按 1：1 比例連接的 Biotin-H量的 HCPT 和合成的 Biotin-HCPT 得到很好的分離(如圖 2-2 所示)
