快速方便的病毒RNA/DNA提取系統

病毒核酸提取試劑盒提供一種快速方便的病毒RNA/DNA提取系統，無需酚仿抽提，可迅速從血清、血漿、尿液、腦脊液或其他無細胞體液、病毒培養上清液和鼻咽拭子等樣本中進行病毒RNA/DNA純化，純化后的核酸可用于病毒基因分型研究、病毒流行病學研究和傳染病研究等。

實驗操作：

1、試劑耗材的準備：

（1） 試劑：無水乙醇

（2） RNase 去除的耗材：用0.01% （v/v） DEPC 溶液完全浸泡過夜，高壓滅菌后烘干。

2、實驗步驟：

1． 取200μl 樣品（如血清、病毒培養液、鼻咽拭子等）于1.5ml 離心管中，加入400μl Lysis Buffer，振蕩混勻，室溫孵育10分鐘。

2． 加入450μl Binding Buffer（已加無水乙醇），振蕩混勻。

3． 將600μl混合液轉移到吸附柱中，12,000 rpm 離心1分鐘。棄掉廢液，將吸附柱放入同一收集管中。

4． 將剩余的混合液轉移到吸附柱中，12,000 rpm 離心1分鐘。將吸附柱放入新的收集管中。

5． 加入400μl WB1，12,000 rpm 離心30秒，棄掉廢液，將吸附柱放入同一收集管中。

6． 加入600μl WB2（已加無水乙醇），12,000 rpm 離心30秒，棄掉廢液，將吸附柱放入同一收集管中。

7． 12,000 rpm 空柱離心3分鐘。

8． 將吸附柱放入一個干凈的1.5ml 離心管中，在吸附柱的膜中央小心加入50μl Elution Buffer，室溫靜置2-5 分鐘。12,000 rpm 離心1分鐘收獲純化的核酸溶液，-20℃保存備用。

該產品的特點：

? 30分鐘內快速純化高品質DNA或者RNA

? 無需酚/氯仿抽提，無需乙醇沉淀

? 重復性強，產量高，洗脫體積50-200 μl

? 純化靈敏度高，含有carrier RNA組份，>80%回收率

? 完全去除污染物和抑制劑，適用于各種下游應用\

左圖為腸道病毒EV71型提取核酸RNA后進行熒光定量PCR的檢測結果，樣本為腸道病毒EV71型滅活病毒培養液，病毒含量分別為5×10⁶copies/ml、5×10⁵copies/ml、5×10⁴copies/ml、5×10³copies/ml、5×10²copies/ml，采用碩世生物病毒核酸提取試劑盒進行病毒核酸RNA提取并進行熒光定量PCR分析。實驗結果顯示，使用碩世生物病毒核酸提取試劑盒純化病毒RNA限度可達5×10²copies/ml，可以穩定擴增5×10²copies/ml病毒RNA。