抗病毒抗生素的篩選

抗病毒抗生素的經(jīng)典篩選方法基于是否能夠抑制受病毒粒子感染的細(xì)胞單層上形成裂解噬菌斑。具體方法如下：將受新城（New castle）病病毒感染的雞胚胎成纖維細(xì)胞懸浮液涂在瓊脂平板上，上面覆蓋一張浸漬了試驗樣品的濾紙，將平板進行培養(yǎng)并用中性紅染色，如果細(xì)胞被染色，說明具有抗病毒活性。抗微生物病毒的抗生素也用類似的方法篩選，只是用細(xì)菌和DNA或RNA噬菌體作作為試驗體系。隨著病毒酶的發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)在已開始應(yīng)用目標(biāo)更明確的篩選方法。一個典型的例子是日本國立健康研究所篩選逆轉(zhuǎn)錄病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑時所采用的方法，他們利用poly（dT）poly（A）共聚物作為模板，測定被鼠白血病病毒蛋白催化的DNA合成，用這種方法他們篩選得到了逆轉(zhuǎn)錄酶的抑制劑——制逆轉(zhuǎn)錄酶素Revistin。在進行這類篩選工作時，需要注意的是必須避免體系中存在蛋白酶，否則會得到錯誤的信息，因此在試驗前要加熱到到100℃使蛋白酶失活。重組DNA技術(shù)的發(fā)展為將病毒蛋白克隆到細(xì)菌細(xì)胞并大量表達(dá)提供了方便，這對于抗病毒抗生素的篩選創(chuàng)造了有利條件?？鼓孓D(zhuǎn)錄酶抑制劑、HIV病毒蛋白酶抑制劑及病毒蛋白與細(xì)胞受體的競爭鍵合劑等都是篩選的目標(biāo)。