腹瀉病毒標(biāo)本的采集與處理

簡(jiǎn)介

腹瀉病毒主要從糞便中排出，所以糞便標(biāo)本是用于腹瀉病毒診斷性檢測(cè)的要標(biāo)本。在某些情況下，嘔吐物和血清樣本也可用于實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。在疾病發(fā)病的前幾天，標(biāo)本中存在較大量的病毒，之后下降，但是低水平的排毒可以持續(xù)數(shù)周時(shí)間。

因此，從發(fā)病前幾天收集的標(biāo)本中進(jìn)行病毒檢測(cè)獲得的陽(yáng)性率最高。通常，肛拭子標(biāo)本一般因含病毒顆粒數(shù)量較少，病毒不太可能從中檢出，不如糞便標(biāo)本常用。

材料與儀器

器材：
①一次性無菌手套
②采集管

試劑：
①材料：采集標(biāo)本
②標(biāo)本緩沖液

步驟

腹瀉病毒標(biāo)本的采集與處理基本過程如下：

一、腹瀉病毒標(biāo)本的采集

（1）用于直接檢測(cè)病毒的糞便標(biāo)本，發(fā)病后應(yīng)立即采集，將幾克糞便標(biāo)本盛于清潔的塑料或玻璃容器內(nèi)，密封后送往實(shí)驗(yàn)室。

（2）水樣便可用吸管吸至塑料或玻璃容器內(nèi)，密封后送實(shí)驗(yàn)室。

（3）從腹瀉患兒尿布中采集的糞便可以通過幾種方式進(jìn)行處理：

可以將尿布上面平鋪一層塑料布，或者翻轉(zhuǎn)一次性尿布使塑料面貼在兒童皮膚上以免腹瀉的糞便浸入尿布；另一種方法是，可以用木質(zhì)的壓舌板從尿布中刮取部分腹瀉的糞便，或者剪下一片尿布，將剪下的尿布浸在無菌的水中或者磷酸鹽緩沖液中。有時(shí)也使用經(jīng)十二烷基硫酸鈉-EDTA處理的色譜紙條來收集、轉(zhuǎn)運(yùn)和儲(chǔ)存糞便標(biāo)本。

二、腹瀉病毒標(biāo)本的處理

用于核酸擴(kuò)增，糞便標(biāo)本中經(jīng)常存在抑制PCR反應(yīng)體系中酶的活性的物質(zhì)，妨礙病毒核酸的檢測(cè)，最簡(jiǎn)單的方法就是將糞便稀釋成10％ 的懸液后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

為了提高病毒的穩(wěn)定性，經(jīng)常會(huì)將培養(yǎng)基、防腐劑、胎牛血清或者洗滌劑加到其他用于病毒診斷的臨床樣本中，但是這些物質(zhì)會(huì)干擾某些用于腹瀉病毒的檢測(cè)方法（例如酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)和乳膠凝集試驗(yàn)）的準(zhǔn)確性，所以不應(yīng)該加在糞便標(biāo)本中。標(biāo)本一旦送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，就應(yīng)該儲(chǔ)存在4 ℃，在此溫度下可以放置幾天至數(shù)周。需要長(zhǎng)時(shí)間放置的標(biāo)本應(yīng)該冷凍儲(chǔ)存，最好在-70 ℃，但是某些抗原檢測(cè)試劑盒提示-20 ℃冷凍也可接受。