異亮氨酸營(yíng)養(yǎng)缺乏法收集G1期細(xì)胞
材料與儀器
CHO 細(xì)胞
完全培養(yǎng)基
步驟
1. 用完全培養(yǎng)基培養(yǎng) CHO 細(xì)胞,這樣當(dāng)細(xì)胞轉(zhuǎn)入無異亮氨酸培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞匯合率達(dá) 50%~60% 且處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。
2. 吸棄培養(yǎng)基,用預(yù)溫的無異亮氨酸的培養(yǎng)基沖涮一次細(xì)胞,加入無異亮氨酸的培養(yǎng)基,37℃ 孵育 40~48 小時(shí)。
3. 要重新釋放細(xì)胞的話,就撤換培養(yǎng)基,用含異亮氨酸的預(yù)溫 DMEM 培養(yǎng)基洗涮細(xì)胞兩次,之后加入完全培養(yǎng)基。


