胸、腹水脫落細(xì)胞的制備
原理
在臨床工作中,可以收集到大量自然脫落細(xì)胞,這些細(xì)胞標(biāo)本經(jīng)過簡(jiǎn)單處理,便可成為較好的單細(xì)胞懸液供流式細(xì)胞術(shù)分析。主要包括脫落細(xì)胞、胸腹水細(xì)胞、尿液、內(nèi)鏡刷檢細(xì)胞等。
材料與儀器
胸、腹水
肝素液 PBS
尼龍網(wǎng)
步驟
1. 抽取胸、腹水 50~100 ml,加入 1000 U/ml 肝素液 1 ml,放鹽水瓶中置于 4℃ 冰箱中靜置 6~12 h,棄去上清。
2. 將底部 10~20 ml 用長(zhǎng)吸管移入試管中,用 PBS 液洗 3 次,以 1500 r/min 離心沉淀 5 min。
3. 再加 5 ml PBS 液混勻,用 300 目尼龍濾網(wǎng)過濾,離心沉淀去上清。
4. 少許 PBS 液,混勻;加固定液或低溫保存,備用。


