曠場試驗(open field test)BBB評分
原理
運動行為是動物最基本的行為表現(xiàn)，除了被用于評價藥物、創(chuàng)傷對動物運動功能恢復(fù)的影響，也可用千對轉(zhuǎn)基因或基因敲除動物表型的鑒定。脊髓損傷后可出現(xiàn)與損傷節(jié)段相應(yīng)的各種行為、感覺和括約肌功能障礙，肌張力異常以及病理反射等改變。動物實驗研究中多采用頸胸段脊髓損傷模型來模擬臨床上截癱患者，其預(yù)后依賴于損傷節(jié)段、損傷類型、損傷程度以及損傷后恢復(fù)的時間。針對不同脊髓損傷動物模型造成的不同解剖結(jié)構(gòu)損傷以及相應(yīng)的行為學改變，完整、客觀的運動功能評價系統(tǒng)對損傷后的修復(fù)療效評定具有重要的意義。目前脊髓動物損傷模型的運動功能評價方法可大致分為曠場試驗(open field test)、非開放場地試驗(non-open field test)和聯(lián)合行為學評分法(combined behavioral score)3類。曠場試驗Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)法和Basso-Mouse-Scale(BMS)法是目前應(yīng)用最為廣泛的方法，是在Tarlov法的基礎(chǔ)上建立起來的一種新的神經(jīng)運動功能評價方法，具有與脊髓損傷程度良好的相關(guān)性。非開放場地試驗中包括的步態(tài)分析法、網(wǎng)格爬行試驗、平衡木行走試驗、胸腰高度試驗、斜板試驗、肢體肌力試驗等也被廣泛使用，用來反映大鼠脊髓損傷后后肢負重能力、控制后肢放置能力、后肢肌力大小以及前后肢運動協(xié)調(diào)等行為學改變。聯(lián)合評價法是Gale等在Tarlov法與斜板法結(jié)合的基礎(chǔ)上增加感覺、反射等一些指標建立起來的，包括后肢運動、斜板試驗、伸趾、回縮反應(yīng)、熱板試驗和游泳等7項，能較準確的綜合評定脊髓損傷后大鼠運動、感覺等多方面神經(jīng)功能。BBB評分；適用于對大鼠運動功能的評定，可以確定從損傷初期到后期運動功能的恢復(fù)和差異變化，甚至一些精細運動的改變，如鼠尾的下垂或上翹等。
材料與儀器
實驗動物
四周封閉的敞箱 錄像機
步驟
①手術(shù)前1d將正常大鼠放入曠場內(nèi)熟悉環(huán)境；②手術(shù)后第1天開始進行BBB評分，大鼠BBB評分觀察期為4min; ③可用錄像機錄下視頻后用電腦分析，也可在熟練掌握該評分細則后立即給分。
(3)結(jié)果分析BBB評分表是根據(jù)觀察脊髓損傷大鼠經(jīng)過三個階段的恢復(fù)而建立的，共21分。三個階段為：①早期以無或極少的后肢關(guān)節(jié)運動為特征；②中期包括幾次共濟失調(diào)步態(tài)；③晚期包括精細運動，如拖著腳趾和尾巴，軀干不穩(wěn)定以及爪子交替輪轉(zhuǎn)。
評分項目為：
①0分，未見后肢運動；
②1分；一個或兩個關(guān)節(jié)的輕微運動，通常是髖關(guān)節(jié)和／或膝關(guān)節(jié)；
③2分一個關(guān)節(jié)的廣泛運動或一個關(guān)節(jié)的廣泛運動加上其他關(guān)節(jié)的微運動；
④3分兩個關(guān)節(jié)的廣泛運動；
⑤4分后肢三個關(guān)節(jié)的輕微運動（髖關(guān)節(jié)，膝關(guān)節(jié)和踝關(guān)節(jié)）；
⑥5分兩個關(guān)節(jié)的輕微運動和另一個關(guān)節(jié)的廣泛運動；
⑦6分兩個關(guān)節(jié)的廣泛運動和另一個關(guān)節(jié)的輕微運動；
⑧7分后肢三個關(guān)節(jié)的廣泛運動；
⑨8分無負重拖動或足置于無；
⑩9分足底僅位于負重位，或偶爾／頻繁／持續(xù)的，無足底步行；
?10分偶爾負重步行，無前后肢協(xié)調(diào)運動；
?11分頻繁到持續(xù)的負重步行，無前后肢協(xié)調(diào)運動；
?12分頻繁到持續(xù)的負重步行，偶有前后肢協(xié)調(diào)運動；
?13分持續(xù)的負重步行，頻繁的前后肢協(xié)調(diào)運動；
?14分持續(xù)協(xié)調(diào)步態(tài)，持續(xù)前后肢運動協(xié)調(diào)，運動時優(yōu)勢爪旋轉(zhuǎn)或頻繁，持續(xù)前后肢運動協(xié)調(diào)和偶爾的足背步行；
?15分持續(xù)協(xié)調(diào)步態(tài)，當前肢前進時無或偶有伸趾，優(yōu)勢爪剛觸地時與身體平行；
?16分持續(xù)協(xié)調(diào)步態(tài)，頻繁伸趾，觸地時與身體平行，提起時旋轉(zhuǎn)；
?17分持續(xù)協(xié)調(diào)步態(tài)，頻繁伸趾，優(yōu)勢爪在觸地及提起時均與身體平行；
?18分待續(xù)協(xié)調(diào)步態(tài)，持續(xù)伸趾，優(yōu)勢爪在觸地與身體平行，提起時旋轉(zhuǎn)；
?19分持續(xù)協(xié)調(diào)步態(tài)，持續(xù)伸趾，優(yōu)勢爪在觸地及提起時均與身體平行；21.20分持續(xù)協(xié)調(diào)步態(tài)，待續(xù)伸趾，優(yōu)勢爪在觸地及提起時均與身體平行，但軀體不穩(wěn)定，尾巴持續(xù)上翹；22.21分持續(xù)協(xié)調(diào)步態(tài)，持續(xù)伸趾，優(yōu)勢爪在觸地及提起時均與身體平行，軀體穩(wěn)定。
常見問題
BBB評分的高低代表了大鼠脊髓損傷后后肢運動功能恢復(fù)的狀態(tài)，分值越高，恢復(fù)越好，至21分時即與正常動物相當。其中0-7分屬于恢復(fù)的早期階段，動物無力支撐自身體重，以至于拖著軀干、后腿和臀部；8-13分進入了恢復(fù)的中期，動物可以行走以及支撐自身體重，前后肢協(xié)調(diào)運動開始恢復(fù)；14-21分階段大鼠一些精細運動開始恢復(fù)。
