納他霉素的含量測定

本品為(1R,3S,5R,7R,8E,12R,14E,16E,18E,20E,22R,24S,25R,26S)-22-[(3-氨基-3, 6-二脫氧-β-D-吡喃甘露糖基)氧基]-1,3,26-三羥基-12-甲基-10-氧代-6,11,28-三氧雜三環[22.3.1.05·7]二十八烷基-8,14,16,18,20-五烯-25-羧酸，按無水與無溶劑物計算，含C33H47NO13應為90.0%-102.0%。

1、性狀

本品為類白色至淡黃色結晶性粉末。

本品在冰醋酸中溶解，在N,N-二甲基甲酰胺中略溶，在甲醇中微溶，在乙醇和水中幾乎不溶。

2、鑒別

取本品50mg，加水5mL潤濕，再加0.1%冰醋酸甲醇溶液溶解并稀釋制成每1mL中約含5μg的溶液，照紫外-可見分光光度法（通則0401）測定，在317nm、303nm和290nm的波長處有最大吸收。

在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。

3、檢查

3.1 結晶性

取本品，依法檢查（通則0981）測定，應符合規定。

3.2 酸堿度

取本品0.25g，加水制成每1mL中約含10mg的混懸溶液，依法測定（通則0631），pH值應為5.0~7.5。

3.3 有關物質

照高效液相色譜法（通則0512）測定，避光操作。

供試品溶液：取本品20mg，置100mL量瓶中，加甲醇約20mL，超聲約15分鐘使溶解，用流動相稀釋至刻度，搖勻。

對照溶液：精密量取供試品溶液1mL，置100mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。

系統適用性溶液：取那他霉素20mg，置100mL量瓶中，加鹽酸甲醇溶液（取0.1mol/L鹽酸1mL，加甲醇99mL，混勻）適量，搖勻，放置2小時，即得（1小時內使用）。

靈敏度溶液：精密量取對照溶液5mL，置100mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。

色譜條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（4.6mm×250mm，5μm或效能相當的色譜柱），以乙酸鐵緩沖液（取乙酸銨3.0g和氯化按1.0g，加水760mL溶解并混勻）-乙腈-四氫呋喃（76:24:0.5）為流動相，柱溫40℃（必要時可適當凋節柱溫），檢測波長為303nm，進樣體積20μL。

系統適用性要求：系統適用性溶液色譜圖中，納他霉素峰保留時間約為14分鐘，那他霉素峰與雜質Ⅰ峰（相對保留時間約為1.3）之間的分離度應大于2.5，理論板數按那他霉素峰計算不小于3000，那他霉素峰拖尾因子為0.8~1.3。靈敏度溶液色譜圖中，那他霸素峰高的信噪比應大于10。

測定法：精密量取供試品溶液與對照溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的3倍。

限度：供試品溶液色譜圖中如有雜質峰，雜質Ⅰ峰面積不得大于對照溶液主峰面積的2倍（2.0%），其他單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面積的0.5倍（0.5%），其他雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的2倍（2.0%），小于靈敏度溶液主峰面積的峰忽略不計。

3.4 殘留溶劑

照殘留溶劑測定法（通則0861）測定，應符合規定。

3.5 水分

取本品，照水分測定法（通則0832第一法1）測定， 含水分應為6.0%~9.0%。

3.6 熾灼殘渣

取本品1.0g，依法檢查（通則0841），遺留殘渣不得過0.2%。

3.7 重金屬

取熾灼殘渣項下的遺留殘渣，依法檢查（通則0821第二法），含重金屬不得過百萬分之十。

4、含量測定

照高效液相色譜法（通則0512）測定。

4.1 供試品溶液

取本品約20mg，精密稱定，置100mL量瓶中，加甲醇約20mL，超聲約15分鐘使溶解，用流動相稀釋至刻度，搖勻。

4.2 對照品溶液

取那他霉素對照品20mg，精密稱定，置100mL量瓶中，加甲醇約20mL，超聲約15分鐘使溶解，用流動相稀釋至刻度，搖勻。

系統適用性溶液與色譜條件見有關物質項下。

4.3 系統適用性要求

除靈敏度要求外，其他見有關物質項下。

5、測定法

精密量取供試品溶液與對照品溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算。