DNA偶聯于溴化氰活化的瓊脂糖上
材料與儀器
鹽酸 用前新鮮配制 溴化氰活化 Sepharose 4B (Pharmacia Biotech)
步驟
1) 制備標記的被連接的寡核苷酸探針
2) 稱出3 g溴化氰活化的Sepharose 4B (1 g凍干樹脂可得到終體積約3. 5 mL的凝膠體積)。
3) 將干樹脂置于一個15 mL的錐形聚丙烯管中。用10 mL lmmol/L鹽酸水化樹脂,彈擊及來回顛倒管子以輕輕混勻。1 min后,將漿狀樹脂移入一個60 mL粗燒結玻璃漏斗中,緩緩倒入500 mL 1 mmol/L鹽酸流過漏斗以洗滌和溶脹樹脂(這個過程將花費約 15 min)。
4) 用100 mL水洗滌樹脂,然后用100 mL 10 mmol/L, pH 8.0的磷酸鉀洗滌。
5) 將寡核苷酸偶聯于溴化氰活化Sepharose 4B上。


