單細胞miRNA表達譜
miRNA 是一類22 堿基左右的非編碼RNA,能夠被整合到沉默復合體(RISC)中,使堿基互補的目標mRNA 沉默或降解,以實現其調控作用,與生物正常的生長發育以及各種疾病如癌癥和心血管疾病等的發生都有著密切的關系。
單細胞miRNA表達解決方案
啟因生物獨家引進美國NanoString公司的多基因表達計數系統nCounter assay system,它僅需100 ng的RNA
即可對逾八百個特異的mRNA轉錄子進行準確的定量;它無需酶促和擴增過程,其檢測的敏感性和準確性與實時熒光定量PCR(RT—PCR)技術相當。檢測系統包括樣品制備工作站和數據分析儀,流程包括雜交、純化固定、計數三個步驟。
檢測特點:
精度和準確度:無需擴增,靈敏性和特異性高,并且準確識別度高,可以準確區分高度相似的miRNA;
轉錄覆蓋面全面:全面的代碼集可供人類、小鼠、大鼠和果蠅等的miRNA轉錄,并且每24小時可快速提供96個樣品的上千萬數據;
兼容性強:總RNA,石蠟包埋組織總RNA;
可定制:標準-miRBase 覆蓋版設置,條形碼設置;
樣本來源:除了可對多種來源組織細胞提純的核酸進行定量,還可對新鮮或凍存組織、細胞、細菌等的裂解物以及多聚甲醛固定石蠟包埋(formalin—fixed paraffin.embedded,FFPE)組織細胞的裂解物等直接進行定量檢測。
nCounter技術能夠高通量的檢測800 多種人和人-病毒miRNA、600 余種小鼠miRNA 和400 余種大鼠 miRNA 以及184種果蠅miRNA,并進行圖譜分析,而其靈敏度和特異性更與qPCR 相當;
檢測原理:一段特殊的橋接寡核苷酸(bridge oligo)分別特異的結合目標miRNA 和其對應的miRtag,并使兩者共價連接,經過變性,miRNA:miRtag 復合物成為一條單鏈,這個復合物能夠和特定的捕獲探針、報告探針結合,并像普通的mRNA 一樣被定量檢測。
miRNA表達譜高水平的敏感性、特異性、精度和線性度等使其廣泛應用在腫瘤、神經生物學、發育生物學、干細胞等領域的研究。


