SMART技術

在合成cDNA的反應中事先加入的3'末端帶Oligo（dG）的SMART引物，由于逆轉錄酶以mRNA為模板合成cDNA，在到達mRNA的5'末端時碰到真核mRNA特有的“帽子結構”，即甲基化的G時會連續在合成的cDNA末端加上幾個（dC），SMART引物的Oligo（dG）與合成cDNA末端突出的幾個C配對后形成cDNA的延伸模板，逆轉錄酶會自動轉換模板，以SMART引物作為延伸模板繼續延伸cDNA單鏈直到引物的末端，這樣得到的所有cDNA單鏈的一端有含Oligo（dT）的起始引物序列，另一端有已知的SMART引物序列，合成第二鏈后可以利用通用引物進行擴增。由于有5'帽子結構的mRNA才能利用這個反應得到能擴增的cDNA，因此擴增得到的cDNA就是全長cDNA。