內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型
一、細(xì)胞因子損傷模型
將內(nèi)皮細(xì)胞鋪板后待即將單層融合時,換無血清或低血清培養(yǎng)基,加入細(xì)胞因子如IL-2,TNF-alpha、IFN等,共同孵育一段時間,或者加入藥物與之共孵育,或者加細(xì)胞因子之前先加入藥物孵育后,再加細(xì)胞因子,結(jié)束后測一些指標(biāo)如MTT、LDH、NO、等等看藥物對細(xì)胞因子損傷的保護作用。也可采用不同的時間、不同的濃度來觀察。
二、缺氧-再供氧損傷模型
也是先將內(nèi)皮細(xì)胞鋪板后待即將單層融合時,換無血清或低血清培養(yǎng)基,先將細(xì)胞置于95%N2和5%的CO2的混合氣的缺氧槽環(huán)境中注意保持37度的溫度,用耗氧儀持續(xù)監(jiān)測缺氧槽中的氧分壓,使之保持在0.5 KP左右,細(xì)胞在低氧環(huán)境中培養(yǎng)一段時間后在移入正常的培養(yǎng)環(huán)境,可觀察不同的缺氧時間、不同的給氧時間對內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)功能的影響,也可結(jié)合藥物觀察,入上所述。
此外,內(nèi)皮細(xì)胞的損傷模型尚有雙氧水損傷模型、氧自由基損傷模型、氧化型脂蛋白損傷模型、等等。最后提及一點,樓上說的ox-LDL損傷模型的濃度不是很準(zhǔn)確,因為從目前國內(nèi)外的文獻來看,oxLDL(10-50ug/ml)的濃度一般不會損傷內(nèi)皮細(xì)胞尤其是內(nèi)皮細(xì)胞系,如ECV304,恰恰相反,的濃度的ox-LDL會促進細(xì)胞的增值,國內(nèi)有人報道,ox-LDL造成ECV304凋亡的濃度一般為150ug/ml~200ug/ml,也有用100g/ml的。


