細(xì)胞爬片的方法

【爬片的準(zhǔn)備】
1、爬片可用一般的蓋玻片，也可用專用爬片；
2、應(yīng)用蓋玻片，可根據(jù)自己的需要剪裁成合適的大小，以備置于6孔板、12孔板或24孔板；
3、將剪裁好的爬片，置于濃硫酸中浸泡并過(guò)夜，第二天先用自來(lái)水沖洗20遍，再用三蒸水沖洗3遍（個(gè)人認(rèn)為主要目的是沖洗干凈就可以了），放在飯盒或者培養(yǎng)皿（一定是玻璃的哦，要不然就……）中烘干后進(jìn)行高壓消毒。
【培養(yǎng)板的準(zhǔn)備】
1、 泡酸過(guò)夜
2、 沖洗，烘干（1、2步驟與前大致相同）
3、 放入超凈工作臺(tái)用紫外線照1～2小時(shí)就可以用了（在照之前可以將爬片一并放入，若細(xì)胞貼壁能力不強(qiáng)，可經(jīng)多聚賴氨酸浸片后放入。貼壁能力強(qiáng)的話，就可以省略了，進(jìn)行紫外線消毒）
注： 此步自己的經(jīng)驗(yàn)是爬片可以先浸入消毒后的PBS內(nèi)，緊接著放入培養(yǎng)板內(nèi)。目的：浸過(guò)PBS的爬片依靠表面的液體，可以用培養(yǎng)板孔底貼和緊密，以利于細(xì)胞長(zhǎng)到爬片上。（自己剛開(kāi)始做的時(shí)候，經(jīng)常就是細(xì)胞全都長(zhǎng)在了爬片與培養(yǎng)板之間，爬片上細(xì)胞罕見(jiàn)。）
【細(xì)胞爬片】
1、 胰酶消化細(xì)胞后計(jì)數(shù)
2、 根據(jù)自己的需要選擇合適的細(xì)胞密度種入培養(yǎng)板內(nèi)即可
3、 第二天即可進(jìn)行干預(yù)措施