MEM培養基的配制步驟

1配置前準備：配置培養基新制備的milli water。調節pH值的酸堿溶液也應該使用這種水配置。制備培養基的器皿清洗干凈，并用milli water潤洗兩次。

2.溶解培養基：取5%終體積的milli water，加入到1L玻璃杯中，將干粉培養基倒入燒杯，水洗包裝袋內面兩次，倒入培養液中。磁力攪拌助溶。

3.補加試劑：根據包裝袋說明加入NaHCO3(2.2g)，HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加，10ml)。

4.加抗生素：一般抗生素終濃度——青霉素100U/ml，鏈霉素100U/ml。1L加入10m儲備液。

5.調pH值：加水到1000ml，然后用HCL或者NaOH調節pH到7.2.

6.過濾除菌：采用0.22um濾膜。過濾后分裝于小瓶中(100或200ml)。過濾后pH值一般上升0.1-0.3.

7.加小牛血清：根據培養基配置的量將小牛血清分裝，冷凍保存(-20度)。臨用前將加入小牛血清10%。