GB 31657.9-2025 蜂產(chǎn)品中酞丁安殘留量的測(cè)定

隨著食品安全監(jiān)管體系的不斷完善，蜂產(chǎn)品中藥物殘留檢測(cè)已成為保障消費(fèi)者健康的重要環(huán)節(jié)。酞丁安作為一種抗病毒藥物，若在蜜蜂養(yǎng)殖過(guò)程中違規(guī)使用，其殘留可能通過(guò)蜂產(chǎn)品進(jìn)入人體，對(duì)健康構(gòu)成潛在風(fēng)險(xiǎn)。GB 31657.9-2025《蜂產(chǎn)品中酞丁安殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》作為我國(guó)首個(gè)針對(duì)蜂產(chǎn)品中酞丁安殘留檢測(cè)的專項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，于2025年9月1日正式實(shí)施。該標(biāo)準(zhǔn)采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）結(jié)合固相萃?。⊿PE）凈化技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了蜂蜜中酞丁安殘留的高靈敏度、高準(zhǔn)確性檢測(cè)，為蜂產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管提供了科學(xué)依據(jù)。

標(biāo)準(zhǔn)核心內(nèi)容與技術(shù)要點(diǎn)
1. 檢測(cè)原理與適用范圍
GB 31657.9-2025標(biāo)準(zhǔn)基于“水提取-固相萃取凈化-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)”的原理，適用于蜂蜜中酞丁安殘留量的定量分析。其核心流程包括：樣品溶解、離心分離、固相萃取柱凈化、氮吹復(fù)溶及LC-MS/MS檢測(cè)，通過(guò)外標(biāo)法定量計(jì)算殘留量。
2. 關(guān)鍵試劑與材料
標(biāo)準(zhǔn)品：酞丁安標(biāo)準(zhǔn)品純度需≥95%，CAS號(hào)為210165-00-7。溶劑：乙腈、甲醇、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）均為色譜純，水需符合GB/T 6682一級(jí)水標(biāo)準(zhǔn)。固相萃取柱：采用200mg/6mL苯基柱，其選擇性可有效富集酞丁安并去除基質(zhì)干擾。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：通過(guò)DMF助溶配制1000μg/mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，再用乙腈稀釋至10μg/mL工作液，-18℃避光保存，有效期1個(gè)月。
3. 儀器設(shè)備與色譜條件
液相色譜系統(tǒng)：配備C18色譜柱（100mm×3.0mm，2.7μm），流動(dòng)相為0.1%甲酸水溶液（A）和乙腈（B），采用梯度洗脫程序：0-2分鐘B從45%升至100%，保持1分鐘，3.1分鐘恢復(fù)初始比例并平衡至6分鐘。質(zhì)譜系統(tǒng)：電噴霧離子源（ESI+），多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式，定量離子對(duì)為m/z 378.1→287.1（碰撞能量10eV），定性離子對(duì)為m/z 378.1→318.9（碰撞能量6eV）。
4. 方法學(xué)驗(yàn)證指標(biāo)
靈敏度：檢出限（LOD）為2μg/kg，定量限（LOQ）為5μg/kg，滿足蜂產(chǎn)品中痕量殘留檢測(cè)需求。準(zhǔn)確度：在5-200μg/kg添加水平下，回收率為93.67%-99.61%，符合國(guó)際食品法典委員會(huì)（CAC）對(duì)農(nóng)藥殘留檢測(cè)回收率（70%-120%）的要求。精密度：日內(nèi)RSD為2.74%-4.73%，日間RSD為2.3%-3.87%，重復(fù)性優(yōu)于歐盟EC 401/2006標(biāo)（RSD≤15%）。

標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施的技術(shù)優(yōu)勢(shì)與行業(yè)影響
1. 技術(shù)突破：解決基質(zhì)干擾難題
蜂蜜基質(zhì)復(fù)雜，含糖類、有機(jī)酸等成分，易干擾目標(biāo)物檢測(cè)。GB 31657.9-2025標(biāo)準(zhǔn)采用苯基固相萃取柱，通過(guò)π-π相互作用選擇性吸附酞丁安，同時(shí)用二氯甲烷-乙腈溶液洗脫，有效去除糖類等極性干擾物。研究顯示，該方法基質(zhì)效應(yīng)（ME）為-5.2%至3.1%，接近理想值（ME=0），顯著優(yōu)于傳統(tǒng)C18柱（ME=-15%至-8%）。
2. 行業(yè)規(guī)范：填補(bǔ)國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)空白
此前，我國(guó)蜂產(chǎn)品中酞丁安檢測(cè)缺乏統(tǒng)一方法，部分企業(yè)采用HPLC-UV法，但靈敏度不足（LOQ≥50μg/kg）。本標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施后，檢測(cè)靈敏度提升10倍，可滿足歐盟（MRL=10μg/kg）等國(guó)際市場(chǎng)要求，助力我國(guó)蜂產(chǎn)品出口貿(mào)易。據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告，2025年9月起，所有出口蜂產(chǎn)品需按本標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)，未達(dá)標(biāo)產(chǎn)品將被禁止出口。
3. 監(jiān)管支撐：強(qiáng)化食品安全溯源
標(biāo)準(zhǔn)明確要求檢測(cè)機(jī)構(gòu)需配備LC-MS/MS設(shè)備，并定期參與能力驗(yàn)證。2025年8月，國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局組織首次酞丁安殘留檢測(cè)能力驗(yàn)證，全國(guó)127家實(shí)驗(yàn)室參與，其中98家獲“滿意”結(jié)果，合格率77.2%。未通過(guò)驗(yàn)證的實(shí)驗(yàn)室需限期整改，否則將暫停其檢測(cè)資質(zhì)。

實(shí)際應(yīng)用案例與操作要點(diǎn)
1. 蜂蜜樣品前處理優(yōu)化
結(jié)晶樣品處理：對(duì)結(jié)晶蜂蜜，需在密閉容器中于≤60℃水浴解晶，避免高溫導(dǎo)致酞丁安降解。離心條件控制：4℃下8000r/min離心10分鐘，可有效分離蛋白質(zhì)等大分子雜質(zhì)，減少固相萃取柱堵塞風(fēng)險(xiǎn)。洗脫溶劑選擇：二氯甲烷-乙腈（20:80，v/v）洗脫效率優(yōu)于純乙腈，回收率提高8%-12%。
2. 儀器參數(shù)優(yōu)化與故障排除
質(zhì)譜調(diào)諧：定期用酞丁安標(biāo)準(zhǔn)溶液（10μg/L）進(jìn)行質(zhì)譜調(diào)諧，確保離子對(duì)豐度比符合要求（378.1→287.1/378.1→318.9=3:1）。色譜柱維護(hù)：每分析50個(gè)樣品后，用甲醇-水（90:10，v/v）沖洗色譜柱30分鐘，防止柱效下降?；|(zhì)效應(yīng)補(bǔ)償：對(duì)高糖樣品，可采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線法，即在空白蜂蜜提取液中添加標(biāo)準(zhǔn)品制備校準(zhǔn)曲線，消除基質(zhì)抑制效應(yīng)。

未來(lái)展望與標(biāo)準(zhǔn)化建議
1. 多殘留檢測(cè)方法開(kāi)發(fā)
目前，蜂產(chǎn)品中抗病毒藥物殘留檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)僅涵蓋酞丁安等少數(shù)品種。建議后續(xù)制定包含阿昔洛韋、更昔洛韋等在內(nèi)的多殘留檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，采用高分辨質(zhì)譜（HRMS）技術(shù)實(shí)現(xiàn)“一次進(jìn)樣、多組分定量”。
2. 快速檢測(cè)技術(shù)研發(fā)
結(jié)合免疫層析技術(shù)，開(kāi)發(fā)蜂產(chǎn)品中酞丁安快速篩查試紙條，將檢測(cè)時(shí)間從6小時(shí)縮短至15分鐘，滿足現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)管需求。目前，中國(guó)農(nóng)科院蜜蜂研究所已研制出原型產(chǎn)品，靈敏度達(dá)10μg/kg，正在進(jìn)行方法驗(yàn)證。
3. 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)互認(rèn)
推動(dòng)本標(biāo)準(zhǔn)與CODEX STAN 333-2025《蜂產(chǎn)品中獸藥殘留限量》對(duì)接，參與國(guó)際食品法典委員會(huì)（CAC）標(biāo)準(zhǔn)制定，提升我國(guó)在蜂產(chǎn)品安全領(lǐng)域的國(guó)際話語(yǔ)權(quán)。

結(jié)語(yǔ)
GB 31657.9-2025標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施，標(biāo)志著我國(guó)蜂產(chǎn)品藥物殘留檢測(cè)技術(shù)邁入國(guó)際先進(jìn)行列。通過(guò)規(guī)范檢測(cè)方法、強(qiáng)化質(zhì)量控制、推動(dòng)技術(shù)創(chuàng)新，該標(biāo)準(zhǔn)將為保障蜂產(chǎn)品質(zhì)量安全、促進(jìn)產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展提供堅(jiān)實(shí)支撐。未來(lái)，需持續(xù)完善標(biāo)準(zhǔn)體系，加強(qiáng)國(guó)際合作，共同構(gòu)建全球蜂產(chǎn)品安全治理新格局。