細(xì)菌表達(dá)系統(tǒng)
說(shuō)到生產(chǎn)重組蛋白，大腸桿菌是常見(jiàn)的來(lái)源之一。雖然大部分重組蛋白是在大腸桿菌的細(xì)胞質(zhì)中產(chǎn)生的，但二硫鍵結(jié)合的重組蛋白經(jīng)常是在周質(zhì)中合成的。
氧化棲息地和駐留二硫鍵形成(Dsb)-系統(tǒng)可以通過(guò)將這些蛋白質(zhì)導(dǎo)向周質(zhì)來(lái)增強(qiáng)適當(dāng)?shù)亩蜴I，將周質(zhì)用于具有二硫鍵的重組蛋白更好，但是穿過(guò)細(xì)胞質(zhì)屏障的靶向問(wèn)題會(huì)顯著降低周質(zhì)產(chǎn)量，。讓我們看看涉及的因素和條件蛋白質(zhì)表達(dá)優(yōu)化在細(xì)菌蛋白質(zhì)系統(tǒng)中，蛋白質(zhì)序列和基因?qū)扇苄院捅磉_(dá)的影響
導(dǎo)致異源蛋白質(zhì)不表達(dá)的一個(gè)普遍因素是在感興趣的mRNA中存在"奇怪的"密碼子。有可能通過(guò)密碼子增強(qiáng)的基因生產(chǎn)來(lái)避免這種密碼子異常。基因合成的一個(gè)好處是，它讓你改變基因的密碼子偏好，以便更好地與雜交宿主合作。用不常見(jiàn)的tRNAs加強(qiáng)的表達(dá)批次可以克服大腸桿菌重組基因中固有的密碼子異常。表達(dá)產(chǎn)量和溶解度都受到靶結(jié)構(gòu)域起始和未端殘基的影響，通過(guò)分析蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能，我們可以找到構(gòu)建蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域的最佳位置，通過(guò)將感興趣的蛋白質(zhì)序列與同源蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)相匹配，有可能確定結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)未知的蛋白質(zhì)的合適結(jié)構(gòu)域邊界，如果你沒(méi)有獲得同源蛋白質(zhì)復(fù)合物的途徑，你應(yīng)該使用二級(jí)解剖部分的預(yù)測(cè)。
