流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期時(shí)相和DNA合成法
原理
近年流式光度儀的發(fā)展已成為檢測(cè)細(xì)胞增殖周期主要手段,可進(jìn)行多項(xiàng)柱測(cè),如細(xì)胞周期時(shí)相、DNA 合成強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間等,效果極好,已取代了應(yīng)用同位素等繁瑣方法。培養(yǎng)細(xì)胞是非常適用于做流式細(xì)胞儀檢測(cè)的對(duì)象,程序簡(jiǎn)單、怏速、效果準(zhǔn)確。
材料與儀器
細(xì)胞
流式儀
步驟
1. 細(xì)胞
80 %接近合細(xì)胞;
2. 懸液制備
用消化法制備成單細(xì)胞懸液(細(xì)胞數(shù)量不少于106);懸液制備中要仔細(xì),避免產(chǎn)生細(xì)胞碎片;
3. 檢測(cè)
進(jìn)行流式儀檢測(cè)。
流式細(xì)胞儀除能檢測(cè)細(xì)胞周期時(shí)相變化和反應(yīng)DNA 合成情況外,也可借以了解染色體倍性;另外尚可結(jié)合熒光免疫法對(duì)細(xì)胞膜進(jìn)行分析等。


