細胞生長檢測4:MTS檢測法
MTS 檢測法
1. 培養 IL-2 依賴細胞株 CTLL-2 細胞或 HT-2 細胞(檢測 IL-2 ),或者 IL-3 依賴細胞株 FDC-P1 細胞或 FL5.12 細胞(檢測 IL-3 )到對數生長期。
2. 取 96 孔細胞培養板,每孔加 0.1ml 含 1 × 104 ~ 2 × 104 上述細胞之一的 DMEM 培養液(加 10 %小牛血清)。
3. 每孔加 0.1ml 系列稀釋的待測細胞因子( IL-2 或 IL-3 )樣品或細胞因子標準品,在 37 ℃ 5 % CO2 的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養 24 小時。
4. 每孔加 20 μ l MTS/PMS 混合液,繼續培養 3 ~ 4 小時顯色。
5. 檢測前搖晃培養板 10 秒鐘,混勻顏色。在酶聯檢測儀上,波長 570nm (或 490nm ,或 570nm 和 690nm )處檢測各孔的光吸收值( OD )。用樣品稀釋度對 OD 值( OD570 、 OD490 或 OD570 /OD690 )繪制劑量 - 反應曲線,根據標準品曲線計算樣品中細胞因子的量。


