高效液相色譜儀常規分析操作步驟及規程
1). 嚴格過濾色譜純流動相,根據需要選擇不同的濾膜。
2). 對抽濾后的流動相進行超聲脫氣20~30分鐘。
3). 打開色譜工作站,連接好流動相管道,連接檢測系統。
4). 有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進樣閥,沖洗時速度不要超過10ml/min。
5). 調節流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000psi。選用合適的流速。
6). 設定不同樣品的檢測器分析參數。
7). 等基線走穩即可進樣分析,分析樣品時對樣品的前處理非常重要。
8). 關機時,先關檢測器,泵不要關掉,應改用流動相沖洗泵,不同的流動相沖洗時間不同,一般沖洗30min,若是緩沖鹽作流動相應先用水沖洗30min,再用純甲醇沖洗。
9). 然后關液相泵。
10). 需要把進樣閥沖洗干凈,另把注射器等工具清理整潔。
11). 填寫登記本,由負責人簽字。
注意事項:
1.首先必須是HPLC級的,這一條相信大家都做到了。
2.脫氣。由于流動相里含有微量空氣,經泵的壓力作用,會在流通池里產生氣泡,這對分析產生一定的影響,如噪音增大,甚至于掩蓋信號峰。因此,流動相在使用前必須經超聲脫氣20分鐘以上。
3.過濾。由于流動相里有很微小的垃圾,如不經過過濾,偶爾會卡在單向閥門中,從而產生壓力波動。這一點很多用戶不太注意,等到產生壓力波動又不知道什么原因產生的。
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