子宮內(nèi)膜上皮傳代
換液過(guò)程
50ml 培養(yǎng)瓶棄培養(yǎng)液,加入培養(yǎng)液3ml沖洗一次。
加入10ml培養(yǎng)液
傳代
棄培養(yǎng)液 D-hank's 沖洗1次 0.5%胰蛋白酶和0.1%EDTA 2:1 比例1ml洗一次 6ml消化。
第一次傳代是很難消化,需要在倒置顯微鏡下觀察,有60%細(xì)胞脫壁時(shí) 吸出全部消化液立即加入含10%血清的培養(yǎng)液種植消化。
含有細(xì)胞的消化液離心800g 10min分離細(xì)胞,然后用10ml培養(yǎng)液打散細(xì)胞并接種到50ml培養(yǎng)瓶中。
在以后的傳代過(guò)程中可不必消化道60% 細(xì)胞脫壁,當(dāng)達(dá)到有5%細(xì)胞脫壁時(shí),即可終止消化,然后用20ml培養(yǎng)液沖洗細(xì)胞層將細(xì)胞打散。取10ml接種到另一培養(yǎng)瓶中。
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