人胃腺癌細胞MNK-45體內傳代及接種實體瘤
1、收集對數增長期的MNK-45細胞若干瓶,制備成瘤細胞懸液1*10^8個/ml左右接種到裸鼠脅部皮下。
2、待腫瘤生長到0.8g左右時,選擇1-2只荷瘤(瘤塊必須要求生長良好且無破損)裸鼠,頸椎脫臼處死,置75%酒精浸泡1-2分鐘后裸鼠置超凈工作臺,于無菌條件下,剝取瘤塊并將瘤塊置200目細胞篩用玻璃棒研磨后用生理鹽水或培養液沖洗。
并用1容器收集瘤細胞懸液,待吹打均勻后置10 ml離心管,1 000 r/min離心5 min,傾出上清,如此反復沖洗1-2次,然后用生理鹽水或培養液適當稀釋瘤細胞懸液,將腫瘤細胞數調到1*10^8個/ml左右,接種到裸鼠脅部皮下。
3、下次傳代重復第二步驟即可。此外,實驗接種時也可用此法,不過應將接種細胞數適當減少。我個人認為用這種方法比用培養的細胞接種傳代好。原因如下:A 接種后的腫瘤形成率高。B 用1-2只裸鼠,就可制備許多細胞懸液。C 省時省力。
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