小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7的消化及傳代
RAW264.7因是單核巨噬細(xì)胞其生物學(xué)特性就是貼壁特別牢，普通的方法根本就不可能將它消化下來(lái)，這也是養(yǎng)這種細(xì)胞最頭痛的問(wèn)題。現(xiàn)將我的一點(diǎn)心得，簡(jiǎn)介如下：
消化液：0.5％胰酶、0.2％EDTA，實(shí)驗(yàn)前加溫到37度
以50ml培養(yǎng)瓶為例：
1、細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，長(zhǎng)滿(mǎn)瓶底80％時(shí)，棄去培養(yǎng)液，加D-HANKS 漂洗 兩次；
2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1－2ml,消化37℃約2-5min，鏡下可見(jiàn)細(xì)胞基本圓形回縮即中止消化，棄消化液加D-HANKS 漂洗兩次；
3、加入新培養(yǎng)液10ml復(fù)吹打混懸細(xì)胞，按需要分入 新的培養(yǎng)瓶；
4 、入37℃5％CO2孵箱，幾小時(shí)后即可再貼壁 。
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