刀豆球蛋白A（ConA）凝集實驗

原理

刀豆球蛋白屬凝集素：凝集素（Lectin）是一類可結合特定糖基的蛋白質。每個凝集素分子有兩個以上的結合位點。癌細胞和轉化細胞所需凝集素的濃度比正常細胞低，這可能與細胞表面凝集素受體分布有關；正常細胞分散，癌細胞較集中，結合性增強。

材料與儀器

細胞
PBS ConA
振蕩器 玻璃板

步驟

1.  細胞懸液制備
用pH7.4的磷酸緩沖液（PBS）制成每毫升含10×104 個細胞的懸液；

2.  ConA PBS
用PBS配制成0.59 %的ConA液；

3.  凝集試驗
向若干凹孔玻璃板凹中加細胞懸液，每凹加0.1 ml，再分別加入ConAPBS 0.1 ml，使ConA的最終濃度依次為：100、50、25、12.5 和零（對照） μg；

4.  置微型振蕩器上振蕩5～10 分鐘后，觀察凝集現象。

5.  結果
如細胞懸液變成絮狀物，說明已發生凝集；細胞凝集反應是測試細胞生物性狀的一個標志。

注意事項

如果細胞懸液變成絮狀物，說明已發生凝集。

常見問題

細胞凝集反應是測試細胞生物性狀的一個標志。
來源：《組織培養和分子細胞學技術》（北京出版社）