細胞的生長參數(shù)

1 ．翻倍時間（ Doubling Time ）

細胞的翻倍時間在評價昆蟲細胞健康程度的參數(shù)中是最容易測量的。翻倍時間應該在細胞處于對數(shù)期復制時測量，對于 Sf9 和 Sf21 細胞來說通常是介于 16-24 小時之間，不過大多數(shù)在 20-22 小時。

dt=t × ln2/ln(Ct/Co) ，其中 dt 為翻倍時間， Co 為起始細胞數(shù)目， Ct 為經(jīng)過時間 t 后的細胞數(shù)目， t 為 Co 和 Ct 兩次計數(shù)之間的間隔時間，所有的時間都以小時為單位。

2 ．細胞大小（ Cell Size ）

細胞的大小是監(jiān)測細胞健康程度的一個非常有用的參數(shù)。如果細胞是健康的，細胞的大小均一，都處于該細胞株體積正常變化范圍的下限。細胞的大小在不同的細胞株變化是很大的。對于我用過的 Sf9 和 Sf21 ，典型的直徑是 16-18 m m ，不過我知道有些細胞株小至 14 m m 或者大至 19 m m 仍然很健康。

3 ．滯后期（ Duration of Lag ）

當細胞的密度較低時，會有一個滯后期，其長短取決于分裝或者傳代后細胞的密度。一般說來，該密度越低，滯后期越長。對于一個特定的細胞株來說，當這個密度高出一個閾值時，滯后期的長短與密度無關；而低于一個閾值時，滯后期無限長，細胞不再增殖。

4 ．低密度分裝極限（ Low Density Split Tolerance ）

能夠在一個較短的滯后期（小于 12 小時）復蘇的細胞形狀較好。不過這是細胞株的特性，需要進行實驗來確定你的細胞株的密度極限。我的細胞株有些在分裝成密度為 5 × 10⁴ 細胞 /ml 時仍然可以很好復蘇，有些細胞株分裝成 5 × 10⁵ 細胞 /ml 就不能復蘇了。

5 ．高密度極限（ High Density Maximum ）

這是你的細胞能生長的最大密度，高于這個密度你的細胞將進入平臺期。這個指標既和細胞株有關，又和使用的培養(yǎng)液有關。我建議先把你的細胞株培養(yǎng)至平臺期，然后把一些分裝到新鮮的培養(yǎng)液中以后，使剩下的繼續(xù)生長至平臺期，同時密切監(jiān)測細胞狀況。一般來說，細胞的培養(yǎng)要避免密度超過高密度極限的 80% 。對于我培養(yǎng)的細胞，這個極限值從 2 × 10⁶ 至 12 × 10⁶ 細胞 /ml 不等。