定位克隆
定位克隆首先是獲取基因在染色體上的位置的信息,然后采用各種實(shí)驗(yàn)方法克隆基因和進(jìn)行定位。基因的定位克隆策略大體上可以分成四個(gè)步驟。
①通過(guò)家系連鎖分析資料或染色體微小缺失(雜合性丟失,LOH)等數(shù)據(jù),確定基因在染色體上的位置;
②通過(guò)染色體步移(chromosome walking)、染色體區(qū)帶顯微切割等技術(shù),獲得基因所在區(qū)段的DNA片段疊連群(contig),繪制出更精細(xì)的染色體圖譜;
③確定含有候選基因的染色體片段;
④從這些片段中進(jìn)一步篩選目的基因,并作突變檢測(cè)驗(yàn)證和功能分析。
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