ELISPOT的優(yōu)勢(shì)
ELISPOT的優(yōu)勢(shì)
ELISPOT斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫分析使細(xì)胞 因子分泌過(guò)程更加形象。因?yàn)榧?xì)胞 因子圍繞在細(xì)胞 周圍，在被上清液稀釋之前，會(huì)和鄰近細(xì)胞 表面的受體結(jié)合，或者降解。細(xì)胞 因子和GranzemyB ELISPOT實(shí)驗(yàn)是最有效的體外監(jiān)控CD4或CD8T細(xì)胞 抗原的方法。通過(guò)測(cè)定單個(gè)細(xì)胞 因子信號(hào)及其頻率，可以建立具有不同集落大小的特殊T細(xì)胞 庫(kù)。
ELISPOT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞 因子的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)
☆從1到10，000，000，可以精確測(cè)量體外細(xì)胞 因子的分泌頻率，和ELISA 以及四聚體染色、細(xì)胞 內(nèi)細(xì)胞 因子染色相比，具有靈敏度高、特異性好的特點(diǎn)。提高靈敏度非常關(guān)鍵，因?yàn)轶w內(nèi)產(chǎn)生抗原特異性T細(xì)胞 的頻率非常低。
?☆大批量細(xì)胞 分析：可以分析上百個(gè)樣品，檢測(cè)多種抗原。
?☆所需細(xì)胞 濃度低。和其他試驗(yàn)方法相比，ELISPOT方法對(duì)細(xì)胞 濃度沒(méi)有太高的要求，比如，檢測(cè)600中不同的抗原或肽段只需要45ml血。
?☆可以確定CD4或者CD8抗原決定簇。因?yàn)閷?shí)驗(yàn)所需細(xì)胞 量少，實(shí)驗(yàn)靈敏，所有ELISPOT對(duì)于決定簇圖譜的繪制，肽段文庫(kù)的篩選是最理想的選擇。
☆可以建立抗原特異性T細(xì)胞 親和函數(shù)
?☆可以研究未經(jīng)藥物處理過(guò)的T細(xì)胞 的實(shí)際細(xì)胞 因子分泌過(guò)程，T細(xì)胞 分泌物下降，則說(shuō)明T細(xì)胞 產(chǎn)量減低或者單個(gè)細(xì)胞 分泌功能下降。
?☆ELISPOT不破壞淋巴細(xì)胞 活性，可以繼續(xù)進(jìn)行細(xì)胞 克隆以及低溫儲(chǔ)藏研究
?☆低溫存藏的人淋巴細(xì)胞 可以繼續(xù)保持生物學(xué)活性，可以重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟。
ELISPOT是現(xiàn)今研究T細(xì)胞 功能，進(jìn)行T細(xì)胞 診斷最有力的工具，ELISPOT的研究已經(jīng)成為一門科學(xué)。
ELISPOT分析儀專利草案
在病理學(xué)教授Paul V. Lehmann博士帶領(lǐng)下，眾多學(xué)者共同在CWRU大學(xué)通過(guò)了新一代ELISPOT分析儀的專利認(rèn)證。 最初ELISPOT是為了檢測(cè)B細(xì)胞 分泌抗體而問(wèn)世的，因?yàn)門細(xì)胞 分泌細(xì)胞 因子而B(niǎo)細(xì)胞 產(chǎn)生抗體，新一代的ELISPOT增加了檢測(cè)T細(xì)胞 分泌細(xì)胞 因子的功能。
ELISPOT分析具有精確性、客觀性，可重復(fù)性以及自動(dòng)化特點(diǎn)，改變了以往ELISA 的耗時(shí)，結(jié)果不客觀的缺點(diǎn)。
ELISPOT分析儀的出現(xiàn)解決了以下問(wèn)題
?☆哪些斑點(diǎn)是抗原特異性T細(xì)胞 產(chǎn)生的（此斑點(diǎn)具有進(jìn)一步分析價(jià)值），哪些是無(wú)關(guān)細(xì)胞 產(chǎn)生的（此斑點(diǎn)沒(méi)有T細(xì)胞 研究?jī)r(jià)值）
?☆斑點(diǎn)大小的意義
?☆在對(duì)不同細(xì)胞 因子計(jì)數(shù)和分析時(shí)，如何定義斑點(diǎn)最大和最小尺寸
?☆如何從單個(gè)細(xì)胞 基礎(chǔ)上分析
?☆實(shí)驗(yàn)精確度有多高？如果一個(gè)細(xì)胞 產(chǎn)生相似的細(xì)胞 因子，在多大程度上會(huì)干擾分析結(jié)果？
?☆幾次重復(fù)實(shí)驗(yàn)才能使結(jié)果更有意義？
ELISPOT：世界一流科學(xué)家辛勤勞動(dòng)的果實(shí)
ELISPOT分析儀的最初研究在CWEU大學(xué)開(kāi)始，由26名工作人員，15個(gè)科研工作者，和許多來(lái)自BD、Pharmingen的科學(xué)工作者共同努力下研制成功的，為此CTL也成為美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院免疫耐受網(wǎng)絡(luò)（ITN）指定的參考實(shí)驗(yàn)室，專門對(duì)各種ELISPOT臨床試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行測(cè)試。
經(jīng)科學(xué)認(rèn)證的ELISPOT分析儀包括三個(gè)分析模式，適用于客戶不同的消費(fèi)水平、研究目的、外圍設(shè)備，附屬軟件和數(shù)據(jù)處理方法。另外，CTL提供圖像分析服務(wù)，ELISPOT有自己的網(wǎng)上實(shí)驗(yàn)室，可以提供網(wǎng)絡(luò)培訓(xùn)以及為臨床試驗(yàn)項(xiàng)目按照合同約定提供研究服務(wù)。
EILISPOT：科學(xué)革命
自從CTL發(fā)起ELISPOT革命以來(lái)，很多人在借鑒我們的成功經(jīng)驗(yàn)。作為創(chuàng)始人，CTL致力于開(kāi)創(chuàng)ELISPOT新方法并將其提高到科學(xué)的高度
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