親和色譜原理
在生物體內,許多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有與某些相對應的專一分子可逆結合的特性。例如抗原和抗體、酶和底物及輔酶、激素和受體、RNA和其互補的DNA等,都具有這種特性。生物分子之間這種特異的結合能力稱為親和力,根據生物分子間親和吸附和解離的原理,建立起來的色譜法稱親色譜法。親和色譜中兩個進行專一結合的分子互稱對方為配基。如抗原和抗體,抗原可認為是抗體的配基,反之抗體也可認為是抗原的配基。將一個水溶性配基在不傷害其生物學功能的情況下與水不溶性載體結合稱為配基的固相化。
親和色譜法的基本過程是:
1.配基固相化。將與純化對象有專一結合作用的物質,連接在水不溶性載體上,制成親和吸附劑后裝柱(稱親和性)。
2.親和吸附。將含有純化對象的混合物通過親和柱,純化對象吸附在柱上,其他物質流出色譜柱。
3.解吸附。用某種緩沖液或溶液通過親和柱,把吸附在親和柱上的欲純化物質洗脫出來。
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