DNS法及聚酰胺薄膜層析技術(shù)測定蛋白質(zhì)N—末端和蛋白質(zhì)的氨基酸
一、目的:
學(xué)習(xí)DNS法及聚酰胺薄膜層析法測定蛋白質(zhì)N—末端和蛋白質(zhì)的氨基酸組成的原理及技術(shù)。
二、原理:
DNS—Cl在堿性環(huán)境里蛋白質(zhì)和肽的α-氨基酸的氨基起反應(yīng),生成帶有熒光的、穩(wěn)定的DNS-氨基酸
蛋白質(zhì)在水解前與DNS—Cl反應(yīng),產(chǎn)生DNS-蛋白質(zhì),它標(biāo)記在N-末端氨基酸殘基上,經(jīng)水解和薄層層析 而測知是何種氨基酸。蛋白質(zhì)水解后與DNS—Cl反應(yīng),標(biāo)記的是蛋白質(zhì)的氨基酸組成成分,如圖19-1和圖19-2所示。這是一種較為簡便的、適用的蛋白質(zhì)的氨基酸組成成分分析的方法。


