DNA-PCR定量
用同位素標(biāo)記的探針與電泳分離后的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行雜交,根據(jù)放射自顯影后底片曝光強(qiáng)弱可以對模板DNA進(jìn)行定量。Abbot等利用這種方法對人類T細(xì)胞白血病反轉(zhuǎn)錄基因進(jìn)行了定量研究。
PCR擴(kuò)增產(chǎn)物用專為檢測ds-DNA而設(shè)計(jì)的微量熒光計(jì)定量,利用染料H33258專與雙鏈DNA結(jié)合而使熒光增強(qiáng)50倍的特性。可以從標(biāo)準(zhǔn)模板系列稀釋擴(kuò)增產(chǎn)物量曲線上讀出樣品中模板DNA的量或拷貝數(shù),達(dá)到PCR定量的目的。
利用倍比稀釋模板作系列稀釋PCR,求出最低(PCR-EB)檢測限來比較,也是常用的半定量PCR方法。
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