生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本操作
一、玻璃 儀器 的使用及清潔
（一）玻璃 儀器 的洗滌及干燥
1、一般儀器：燒杯、試管、離心管等普通玻璃儀器，可直接用毛刷蘸餐洗凈刷洗，然后用自來(lái)水沖洗，直至容器內(nèi)不掛水珠即可。最后用少量蒸餾水沖洗內(nèi)壁2－3次，倒置晾干即可。
2、容量分析儀器：容量瓶、滴定管及吸管等容量?jī)x器，用后用自來(lái)水多次沖洗，如能清潔（壁不掛水珠），再用蒸餾水少量沖洗2~3次晾干即可備用。若仍不干凈附有油污等，則須于干后放入鉻酸洗液內(nèi)浸泡數(shù)小時(shí)，然后倒凈（或撈出）洗液，用自來(lái)水充分沖洗至水不顯黃色后再?zèng)_幾次，最后用少量蒸餾水沖洗2~3次晾干備用。
在做酶學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí)，對(duì)儀器的清潔要求更高，因如有極微量的污物（如重金屬離子）即可導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)失敗。因此，必要時(shí)儀器經(jīng)上述方法洗滌后，還需用稀鹽酸或稀硝酸洗滌，以除去鉻及其它金屬離子，然后再用自來(lái)水、蒸餾水沖洗。生化實(shí)驗(yàn)室常用的洗液有以下幾種：
（1）鉻酸洗液：為最常用的洗液，由重鉻酸鉀、粗硫酸及水配制而成，去污力強(qiáng)，清洗效果好。其配制方法有多種，可根據(jù)需要進(jìn)行選擇，常用的配方如下表。
重鉻酸鉀（ｇ）10060100
水（ml）750300200
粗硫酸（ml）250460800
清潔性能較弱較強(qiáng)（常用）最強(qiáng)
配制方法為：先將重鉻酸鉀溶于水，再慢慢加入濃硫酸。因配制過(guò)程產(chǎn)生大量熱，容器需放入冷水中，邊加硫酸邊攪動(dòng)混合。由于產(chǎn)熱量很大，使用玻璃容器有破裂的危險(xiǎn)，所以最好用耐高溫的陶瓷或耐酸的搪瓷容器。洗液可多次反復(fù)使用，如效力變?nèi)酰杉尤肷倭恐劂t酸鉀及濃硫酸繼續(xù)使用，但如果變?yōu)榫G色，則不宜再用。
（2）10%尿素液：為蛋白質(zhì)良好溶劑，幫適用于洗滌盛血的容器。
（3）草酸鹽液：用于清洗過(guò)錳酸鉀的痕跡。
（4）硝酸液：用1：1的硝酸水溶液，用于清洗CO2測(cè)定器及微量滴定管。
（5）乙二胺四乙酸二鈉（EDTA－Na 2 ）液：5~10%的EDTA－Na 2 液可用于洗滌器皿內(nèi)無(wú)機(jī)鹽類。
玻璃儀器的干燥方法可根據(jù)不同儀器的種類而定。一般地說(shuō)洗凈后的玻璃儀器，如不急用應(yīng)倒放在晾架上令其自然干燥。若有急用可放在烘烤箱中烤干，但容量玻璃儀器，如容量瓶、吸量管、滴定管以及燒結(jié)、結(jié)構(gòu)復(fù)雜的玻璃儀器等，嚴(yán)禁烘烤。此類儀器，如急用可采用水泵抽氣法干燥。
（二）常用玻璃儀器的使用
1、吸量管：吸量管是用來(lái)測(cè)量一定容積的液體，并把它從一個(gè)器皿轉(zhuǎn)移至另一個(gè)器皿中的量器。常用的吸量管有以下幾種：
（1）刻度吸量管：刻度吸量管是多刻度吸量管，有0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0毫升等規(guī)格。吸量管刻度所標(biāo)的數(shù)字有自上而下和自下而上兩種，使用之前應(yīng)仔細(xì)分辨。實(shí)驗(yàn)室所用之刻度吸管多屬于刻度到尖端的吸管，所以要吹出尖端留存的液體。
（2）奧氏吸管：在量取粘度較大的液體如血液、血清等時(shí)，應(yīng)當(dāng)使用奧氏吸管。這種吸管也是單標(biāo)的，并且在其下端有一個(gè)膨大部分。所以液體與吸管表面接觸面積較小，當(dāng)量取血液時(shí)，較他種吸管準(zhǔn)確。奧氏吸管的容量包括遺留在尖端的液體，故在緩緩使液體流出后，再停留數(shù)秒鐘，吹出最后一滴。在學(xué)生實(shí)驗(yàn)中常用的有1、2、5毫升等規(guī)格。
吸量管使用法：使用吸量管時(shí)，用拇指和中指靠近頂端部分。將管的下端插入液體里，用吸球吸入液體至需要刻度的標(biāo)線上1~2厘米處（插入液面下的部分不可太深，以免管的外壁沾附的溶液太多；也不可太淺，防止空氣突然進(jìn)入管內(nèi)，將溶液吸入吸球內(nèi)），將已充滿液體的吸量管提出液面，用小片濾紙揩去管外沾附的溶液，把吸管提到與眼睛在同一水平線上。然后小心松開上口，按所需要液體容積緩緩自由流出。最后再根據(jù)規(guī)定吹出或者不吹出尖端的一滴。
（3）微量加樣器
2、容量瓶及量筒：容量瓶是一個(gè)細(xì)長(zhǎng)頸梨形的平底瓶，具有磨口塞，頸上有標(biāo)線，表示在所示溫度下（一般為20℃）當(dāng)液體充滿到標(biāo)線時(shí)，液體體積恰好與瓶下所注明的體積相等。容量瓶有10、25、50、100、200、250、500、1000、2000毫升等規(guī)格。
容量瓶是裝量型的定量容器，多用作稀釋溶液或配制精確 試劑 。當(dāng)將液體加至刻度后須用瓶塞塞好，顛倒混勻數(shù)次方可使用。
容量瓶是較精確的定量容器，不得直接加熱或烘烤，也不應(yīng)將盛有溶液的容量瓶放入冰箱內(nèi)。當(dāng)配制溶液需要加熱促其溶解時(shí)，必須在燒杯中加熱溶解，并待溶液達(dá)到室溫后，再定量地轉(zhuǎn)入容量瓶?jī)?nèi)，然后稀釋到刻度，并要注意搖勻。
當(dāng)所量取的液體量要求不十分準(zhǔn)確時(shí)，可使用量筒，因其較使用吸管或量瓶更為簡(jiǎn)便，量筒之底座及筒身是焊接一起的，因而不能 量取過(guò)熱液體，更不能直接加熱，以防炸裂。
3、滴定管：滴定管是供容量分析滴定之用，有帶玻塞及橡皮管的兩種類型。前者用以量酸，后者用以量堿。
滴定管有刻度較精細(xì)的微量滴定管，有1.0、2.0、5.0、10毫升等規(guī)格。還有25、50、100毫升等規(guī)格的常量滴定管。使用滴定管應(yīng)該注意以下事項(xiàng)：
（1）檢查是否清潔干燥，是否漏水，玻塞是否滑潤(rùn)，如有漏水或轉(zhuǎn)動(dòng)不靈，應(yīng)拆下活塞重新涂抹凡士林。涂抹前要將玻塞擦干，用手指沾少量凡士林在活塞兩頭各擦一薄層，將活塞插入槽內(nèi)，然后向同一方向轉(zhuǎn)動(dòng)活塞，直到從外面看時(shí)，全部透明為止。油涂好后，在活塞的小頭的槽上套一橡皮圈，以防活塞滑脫。
（2）使用前必須認(rèn)出每一格表示多少毫升。先用少量滴定液清洗滴定管2~3次，然后方可裝液。裝液體后，管內(nèi)如有氣泡必須排出。
（3）滴定前先應(yīng)讀取起始點(diǎn)。滴定時(shí)，左手控制玻塞，右手持瓶，邊滴邊搖，密切注意被滴定溶液的顏色變化。
（4）裝置滴定管時(shí)，管身必須與地面垂直。讀數(shù)時(shí)眼睛與溶液月形面下緣在同一水平線上，不要仰頭或低頭讀數(shù)。
（5）如用酸式滴定管裝堿性溶液，滴定后應(yīng)立即洗凈，以免活塞粘連。
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