氣相色譜法測定乙烯含量
乙烯（ethylene）是植物內(nèi)源激素之一。以氣體形式存在。準(zhǔn)確測定乙烯釋放量，對(duì)認(rèn)識(shí)乙烯在植物抗逆生理、發(fā)育生理、開花生理中的作用有著重要的意義。
一、 原理：氣相色譜具有靈敏度高，穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。色譜儀中的分離系統(tǒng)包括固定相和流動(dòng)相。由于固定相和流動(dòng)相對(duì)各種物質(zhì)的吸附或溶解能力不同，因此各種物持的分配系數(shù)（或吸附能力）不一樣。當(dāng)含混合物的待測樣（含乙烯的混合氣）進(jìn)入固定相以后，不斷通以流動(dòng)相（通常為N 2 或H 2 ），待測物不斷地再分配，最后，依照分配系數(shù)大小順序依次被分離，并進(jìn)入檢測系統(tǒng)得到檢測。檢測信號(hào)的大小反映出物質(zhì)含量的多少，在記錄儀上就呈現(xiàn)色譜圖。要使待測物得到充分的分離，就需要一種合適的固定相。乙烯往往與乙炔、乙烷難以分離，而采用GD×502作為固定相則可有比較滿意的效果。
二、材料、 儀器 設(shè)備及試劑
（一）材料：水稻幼苗（或蘋果、香蕉等）若干。
（二） 儀器 設(shè)備：1. 密封裝置為帶空心橡皮塞的三角瓶，或真空干燥器。2. 氣相色譜儀。
（三） 試劑 ：標(biāo)準(zhǔn)乙烯。
三、實(shí)驗(yàn)步驟
1. 將試驗(yàn)材料進(jìn)行不同的處理（如離體、傷害、發(fā)芽、黑暗、輻射、冷藏、催熟等），然后置于密封裝置中若干時(shí)間。
2. 將色譜儀啟動(dòng)。啟動(dòng)步驟如下：
（1）檢測儀器各部件是否復(fù)位。若沒有，需復(fù)位。
（2）打開流動(dòng)相（N 2 ），將壓力調(diào)至（5kg/cm 2 ）。然后打開儀器上的N 2 閥，將流速調(diào)至25m/min（管道1，2一樣）。
（3）插上電源，打開儀器上電源開關(guān)。
（4）調(diào)節(jié)柱溫至60℃，將進(jìn)樣口溫度調(diào)至100℃（乙烯為氣體，進(jìn)樣口溫度不需太高）。
（5）打開點(diǎn)火裝置電源及空氣壓縮機(jī)開關(guān)、調(diào)節(jié)適當(dāng)?shù)牧砍毯退p（range and attenuation）（關(guān)機(jī)時(shí)，量程應(yīng)打至1，衰減為∞）。
（6）打開鋼瓶氫氣閥，調(diào)壓力為1.0kg/cm 2 ）（兩管道一樣），同時(shí)將空氣壓力調(diào)至0.5kg/cm 2 。打開記錄儀電源，并選擇10mV的輸出電壓和適當(dāng)?shù)淖呒埶俣龋?0nm/min）。
（7）點(diǎn)火：空氣和氫氣調(diào)好后，將選擇鍵打到ON位置。按點(diǎn)火鍵10S左右，氫氣既可在燃燒室燃燒，在點(diǎn)火并點(diǎn)著時(shí)，可以看到記錄筆向上移動(dòng)。
（8）條件選擇：將選擇鍵打到2，并將空氣壓力調(diào)至1.0kg/cm 2 ，氫氣調(diào)至0.5～0.7kg/cm 2 之間（兩管道一樣）。待基線穩(wěn)定后即可正式測定。
3. 測定
（1）取一定濃度（μl/L，以N 2 作為稀釋劑），一定量（100～1000μl）的標(biāo)準(zhǔn)乙烯進(jìn)樣，并注意出峰時(shí)間。待乙烯峰至頂端時(shí)即為乙烯的保留時(shí)間，重復(fù)3～4次，得到平均值。該平均值即作為樣品中乙烯定性的依據(jù)之一。
（2）取同樣量的待測樣品，注入色譜柱（進(jìn)樣）。待樣品峰全部出完后，即可做下一個(gè)樣品。
（3）定性：A.外標(biāo)法定性：樣品中與標(biāo)準(zhǔn)乙烯保留時(shí)間相同的峰，即為樣品乙烯峰。B.內(nèi)標(biāo)法定性：在得到某一樣品的色譜圖后，向該樣品中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)乙烯進(jìn)樣，若某峰增高，該峰即為樣品中乙烯峰。4.待得到所有樣品色譜圖后，可關(guān)機(jī)，關(guān)機(jī)步驟：
（1）關(guān)掉氫氣總閥或氮?dú)饪傞y。
（2）關(guān)掉空氣壓縮機(jī)。
（3）將量程或衰減復(fù)位，選擇鍵打到OFF。
（4）關(guān)掉記錄儀。
（5）待H 2 、N 2 全部排完后，將所有閥復(fù)位。
（6）關(guān)主機(jī)電源，并拔下插頭。
四、結(jié)果計(jì)算
樣品中乙烯濃度（μl/L）＝樣品峰高×標(biāo)樣濃度/標(biāo)準(zhǔn)峰高
樣品乙烯生成速率（μl/g/h）＝乙烯濃度（μl/L）×容器體積（L）/[密封時(shí)間（h）×樣品重量（g）]
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